貯藏期獼猴桃果實表面潰瘍病病原菌的快速檢測方法研究

貯藏期獼猴桃果實表面潰瘍病病原菌的快速檢測方法研究
朱丹 曹凡 高貴田 王鐸 徐雅芬 杜瑩琳 張鑫 李朝正 孫強(qiáng) 周敏娜
【摘要】：為建立獼猴桃果實表皮潰瘍病病原菌(Psa)的快速檢測方法,以陜西周至縣貯藏期的海沃德獼猴桃為材料,用King’s B液體培養(yǎng)基培養(yǎng)獲得果實表面病原菌,采用細(xì)菌DNA提取試劑盒及熱裂解法提取總DNA;根據(jù)陜西獼猴桃Psa的hrp W保守區(qū)設(shè)計2對特異引物進(jìn)行巢式PCR擴(kuò)增,并對擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行測序。結(jié)果表明,從4個獼猴桃貯藏庫抽取40個樣品,其中8個樣品檢測出陽性擴(kuò)增;對特異擴(kuò)增得到的550bp的hrp W序列進(jìn)行BLAST對比分析,發(fā)現(xiàn)該序列與丁香假單胞桿菌獼猴桃致病性變種(Pseudomonas syringae pv.actinidiae)的hrp W序列同源性為99%。此外,本試驗建立的巢式PCR檢測方法對Psa的檢出限為103cfu·m L~(-1),檢測方法特異性強(qiáng),靈敏度高,能減少假陽性的出現(xiàn),保證了快速檢測結(jié)果的可靠性,為控制獼猴桃果實傳播Psa提供了理論依據(jù)。

如何防止獼猴桃潰瘍病

（獼猴桃商品花粉）

（獼猴桃潰瘍病）